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無菌實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范及要求!

更新時(shí)間:2021-03-05      點(diǎn)擊次數(shù):2018

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一、無菌室的級(jí)別
 
根據(jù)空氣潔凈度的不同,無菌室可分為哪幾個(gè)級(jí)別一般情況下,無菌室的等級(jí)有百級(jí),千級(jí),萬級(jí),十萬級(jí),Million級(jí)等等。
 
凈化等級(jí)一般分為100級(jí)、1000級(jí)、10000級(jí)、100000級(jí),現(xiàn)在2010年版的GMP 凈化車間已經(jīng)不用這個(gè)叫法了,分為ABCD級(jí)別,分別相對(duì)應(yīng)于98版的幾個(gè)級(jí)別,通過檢測區(qū)域內(nèi)的塵埃粒子數(shù)、浮游菌數(shù)、沉降均數(shù)評(píng)價(jià)凈化級(jí)別,各個(gè)級(jí)別 有不同的要求,凈化等級(jí)分靜態(tài)、動(dòng)態(tài)兩種。
 
二、無菌室設(shè)計(jì)建設(shè)要點(diǎn)
 
無菌室內(nèi)的地面、墻壁必須平整,不易藏污納垢,便于清洗。工作臺(tái)的臺(tái)面應(yīng)該處于水平狀態(tài)。無菌室和緩沖間都裝有紫外線燈,無菌室的紫外線燈距離工作臺(tái)面 1 米。工作人員進(jìn)入無菌室應(yīng)穿滅過菌的服裝,戴帽子。
 
當(dāng)前無菌室多存在于微生物工廠,一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺(tái)。超凈臺(tái)其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過電動(dòng)裝置使空氣通過高效過濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面,使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。
 
在條件較困難的地方,也可以用木制無菌箱代替超凈臺(tái)。
 
無菌箱結(jié)構(gòu)簡單,便于移動(dòng),箱正面開有兩個(gè)洞,不操作時(shí)用推拉式小門擋住,操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去。正面上部裝有玻璃,便于在內(nèi)部操作,箱內(nèi)部裝有紫外線燈,從側(cè)面小門可以放進(jìn)去器具和菌種等。
 
三、無菌室操作規(guī)范
 
1、無菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。
 
2、嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。
 
3、無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
 
4、無菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無菌室的潔凈度符合要求。
 
5、需要帶入無菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。
 
6、無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢,應(yīng)及時(shí)清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。
 
7、無菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺(tái)開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15mL,放至凝固后,倒置于30-35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),證明無菌后,取平板3-5個(gè),分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于30-35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落,10000級(jí)潔凈室平均不得超過3個(gè)菌落。如超過限度,應(yīng)對(duì)無菌室進(jìn)行*消毒,直至重復(fù)檢查合乎要求為止。
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